Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – метод получения множества копий определённых фрагментов ДНК в образце для последующего качественного и количественного анализа. Его разновидность, называемая полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР), позволяет выявлять РНК, превращая её в комплементарную ДНК с помощью обратной транскриптазы. Однако здесь возникают трудности из-за загрязнений в виде ДНК, которая также будет амплифицироваться. Существующие методы очистки не дают 100% гарантии.

Поэтому исследователи из Италии и Хорватии пошли другим путём. При использовании модифицированного ими праймера, который содержит несовпадающие основания, на этапе обратной транскрипции образуются молекулы кДНК, которые отличаются от геномной ДНК. При использовании того же модифицированного праймера в ПЦР амплифицируется только кДНК, поскольку геномная ДНК частично гетерологична праймеру. Таким образом, на амплификацию больше не влияет какое-либо потенциальное загрязнение ДНК.

August 12 at 6:23

Источник